CD226分子siRNA慢病毒载体的构建和鉴定

摘要：

为设计筛选针对人CD226分子的siRNA序列,构建相应的siRNA慢病毒载体,检测其对Jurkat/E6细胞膜表面天然CD226分子表达水平的影响,首先设计并合成4对siRNA双链寡聚核苷酸,与CD226分子真核表达载体共同转染293T细胞,挑选出最有效抑制CD226表达的序列.应用基因工程技术,将该序列连接于慢病毒载体pLKO.1中,构建携带针对目的基因CD226的siRNA慢病毒载体.使用慢病毒包装质粒混合物和构建好的慢病毒载体共转染293T细胞,收集上清,感染Jurkat/E6细胞系,对病毒感染效果进行检测.结果在4条针对CD226分子设计的siRNA序列中,siRNA-513最为有效的抑制了外源性CD226分子的表达,带有该序列的慢病毒载体pLKO-CD226可以完全抑制Jurkat/E6细胞上天然分子的表达.说明应用基因工程技术成功构建了针对CD226分子的RNA干扰慢病毒载体,为深入研究人类黏附分子CD226在机体免疫功能方面提供了技术支持.

关键词：CD226、siRNA、慢病毒载体

所属期刊栏目：10

分类号：R392.11

资助基金：国家自然科学基金课题30801003

在线出版日期：2010-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3068-3071,3086