BIG-3的原核表达、纯化及其多克隆抗体的制备与鉴定

摘要：

原核表达、纯化骨形态发生蛋白诱导基因(BIG-3,BMP-2-induced gene 3 kb)所编码的融合蛋白并制备其多克隆抗体.将BIG-3基因插入原核表达载体PGEX-4T-2的多克隆位点获得pGEX-4T-2-BIG-3重组表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,诱导表达,SDS-PAGE鉴定融合蛋白表达情况及Sepharose 4B层析柱亲和层析法纯化的融合蛋白;用纯化的融合蛋白免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体,并以Western blot鉴定其特异性.结果在大肠杆菌中获得BIG-3-GST融合蛋白高水平的诱导表达,经Sepharose 4B层析柱亲和层析,GST-BIG-3融合蛋白在电泳图片上显示较为清晰的单一条带,所制备的多克隆抗体具有较高的特异性.说明在大肠杆菌中成功表达且以亲和层析法纯化得到了BIG-3-GST融合蛋白,并制备了特异性较高的多克隆抗体.

关键词：骨形态发生蛋白质类、原核表达、融合蛋白质类、多克隆抗体

所属期刊栏目：7

分类号：R321.51(人体形态学)

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：3519-3522