乙型脑炎病毒E蛋白Ⅲ区基因的克隆表达及亲合层析纯化

摘要：

克隆表达JEV E蛋白Ⅲ区基因,序列测定正确后进行融合表达、纯化.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)从JEV cDNA中扩增Ⅲ区基因,用限制性内切酶消化后插入到PMD-18T载体,序列测定正确后,再亚克隆到融合表达载体pET32a中.转化大肠杆菌BL21(DE3),目的基因经IPTG诱导,由T7启动子调控表达了氨基端带6个连续组氨酸残基的JEV E Ⅲ区蛋白.在变性条件下对目的蛋白进行纯化,获得了融合6个组氨酸残基的JEV E Ⅲ区蛋白,蛋白纯度大于80%.证实构建了JEV E Ⅲ基因的重组表达载体,并获得了高纯度的融合表达蛋白,为以后的深入研究奠定了基础.

关键词：日本脑炎病毒、克隆、表达、纯化

所属期刊栏目：7

分类号：R512.32(传染病)

资助基金：国家自然科学基金30400378;30600526

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3373-3377