Rab25基因siRNA表达载体的构建鉴定及在人卵巢癌细胞A2780中的表达

摘要：

为研究Rab25基因的功能及卵巢癌的基因治疗,构建针对Rab25基因的siRNA表达载体.转染细胞A2780后观察其对Rab25基因表达的抑制作用,为探索卵巢癌基因治疗的新途径打好基础.根据基因库上的Rab25mRNA序列,设计并合成两端含有酶切位点的64个碱基的寡核苷酸链.寡核苷酸链退火后用T4DNA连接酶连接到线性化的pSUPER质粒中,并对重组质粒(命名为pSUPER/Rab25siRNA)进行酶切及序列鉴定,后转染卵巢癌细胞A2780,RT-PCR检测转染前后Ra25的表达情况.双酶切证实RaB25sinRNA表达载体克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致.RT-PCR检测显示转染卵巢癌细胞A2780后有效抑制了Rab25基因的表达.成功构建Rab25siRNA表达载体,为卵巢癌基因治疗开辟新途径.

关键词：Rab25、sinRNA、载体构建、鉴定、卵巢癌、表达

所属期刊栏目：7

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

在线出版日期：2007-07-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3368-3372