miR-490-3p调控SW1990胰腺癌细胞上皮间充质转化

摘要：

目的 研究miR-490-3p在分子水平上通过HMGA2蛋白对SW1990细胞上皮间充质转化的影响.方法 通过实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)检测正常胰腺导管上皮细胞HPDE和人胰腺癌细胞SW1990中miR-490-3p的表达.通过转染质粒[miR-490-3p阻遏物(inhibitor)和miR-490-3p模拟物(mimic)以及各自的阴性对照质粒]调控miR-490-3p在SW1990细胞中的表达并通过RT-qPCR法验证转染效率.转染48 h后,通过CCK8检测、划痕法、Transwell小室检测,流式细胞仪检测等分别检测细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等恶性生物学特征的影响.通过Western blot检测细胞中上皮间充质转化相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的蛋白表达水平.同时,用数据库预测miR-490-3p及其靶基因HMGA2的靶向关系,并通过双荧光素酶报告基因实验进行验证,通过Western blot检测细胞中HMGA2的蛋白表达水平.结果 (1)与HPDE正常细胞相比,SW1990癌细胞中miR-490-3p表达水平明显降低(P=0.215);(2)miR-490-3p上调后,SW1990细胞的凋亡率显著高于对照组(P＜ 0.0001),而细胞增殖、迁移和侵袭能力显著低于对照组(P＜ 0.0001).miR-490-3p下调后,SW1990细胞的凋亡率显著低于对照组(P＜ 0.0001),而细胞增殖、迁移和侵袭能力显著高于对照组(P＜ 0.0001);(3)miR-490-3p上调后,SW1990细胞中的N-cadherin表达量显著高于对照组(P＜ 0.0001),而E-cadherin的表达水平显著低于对照组(P＜ 0.0001);miR-490-3p下调后,SW1990细胞中的N-cadherin表达量显著低于对照组(P＜ 0.0001),而E-cadherin的表达水平显著高于对照组(P＜ 0.0001);(4)HMGA2是miR-490-3p的靶向基因.结论 miR-490-3p可通过靶向HMGA2抑制SW1990胰腺癌细胞EMT,从而影响胰腺癌的的发生发展进程,揭示HMGA2和miR-490-3p可能为胰腺癌诊断和治疗的靶点.

关键词：胰腺癌、上皮间充质转化、miR-490-3p、HMGA2

所属期刊栏目：42

分类号：R737.31(肿瘤学)

资助基金：昆明市卫生健康委员会卫生科研基金资助项目;昆明市延安医院院内基金资助项目

在线出版日期：2021-05-10（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：10-17