SOX9慢病毒表达载体的构建及其在LNcap细胞中的稳定表达

摘要：

目的 构建SOX9基因慢病毒表达载体,建立稳定表达SOX9的LNCaP细胞株.方法 PCR扩增SOX9基因,将其克隆到慢病毒表达载体pLVX-IRES-Puro中,双酶切和测序鉴定重组质粒.用HEK293细胞包装重组病毒颗粒并感染LNcap细胞,经puromycin筛选获得稳定转染细胞株.qRT- PCR和Western Blot分别检测SOX9 mRNA水平及蛋白表达.结果 经双酶切和测序鉴定证实目的片段已插入到慢病毒表达载体上.重组质粒转入LNCaP细胞后经puromycin抗性筛获得稳定表达的细胞株,qRT- PCR检测到SOX9基因在转录水平的表达, Western blot分析显示SOX9蛋白高表达.结论 慢病毒表达载体pLVX-IRES-FLAG-SOX9构建成功,实现了SOX9在LNcap细胞中的外源性表达.

关键词：SOX9、慢病毒表达载体、LNcap细胞、脂质体转染

所属期刊栏目：39

分类号：Q786(基因工程（遗传工程）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目31360288

在线出版日期：2018-08-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：5-9