实时定量PCR检测白色念珠菌方法学的建立

摘要：

目的 采用TaqMan MGB探针技术,建立白色念珠菌实时荧光定量PCR (RQ-PCR)检测方法,为临床白色念珠菌的检测提供快捷的方法.方法 以真菌D1/D2区基因的一段高度保守序列为扩增靶序列,合成白色念珠菌特异性引物和探针,提取白色念珠菌标准菌株的DNA,构建含有靶基因片段的重建质粒,扩增后DNA作为标准品,建立白色念珠菌RQ-PCR的标准曲线,并对其重复性、敏感性及特异性等方面进行方法学评价.结果 对构建好的克隆质粒测序,插入片段与预期片段序列一致,相似性达100％.白色念珠菌标准曲线为Y=-3.824x+41.36,R2=0.990,该扩增曲线形态良好.结论 成功建立了实时荧光定量PCR检测白色念珠菌的方法,其敏感性和特异性较好.

关键词：实时定量PCR、白色念珠菌、方法学

所属期刊栏目：38

分类号：R379.4(医学微生物学（病原细菌学、病原微生物学）)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30860315,81160135;云南省科技厅-昆明医科大学联合专项基金资助项目2015FA009

在线出版日期：2018-08-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：55-59