CYP3A4内含子10对CYP3A4基因表达的增强子作用

摘要：

目的 探讨CYP3A4内含子10及其内SNP CYP3A4*1G对CYP3A4基因表达的调控作用.方法 构建CYP3A4启动子启动转录的CYP3A4真核表达质粒,将CYP3A4内含子10 (CYP3A4*1G野生型/突变型)正向或反向插入该质粒的启动子上游,从而构建出不同基因型、不同方向的CYP3A4内含子10调控的CYP3A4真核表达质粒.将构建好的各质粒分别转染人HepG2细胞,应用实时荧光定量PCR方法检测CYP3A4 mRNA表达水平.结果 构建的重组质粒经酶切验证与测序鉴定,插入片段的序列和方向与预期完全一致.无论CYP3A4* 1G野生型还是突变型,反向组CYP3A4 mRNA表达水平均高于正向组(P＜0.01);而CYP3A4内含子10无论是正向还是反向,C YP3 A4* 1G野生型组CYP3A4 mRNA表达水平均高于突变型组(P＜0.01).此外,正向突变组CYP3A4 mRNA表达水平低于阳性对照组,不但没有增强CYP3A4启动子的转录作用反而有所减弱.结论 CYP3A4内含子10有类似于增强子的功能,能够影响CYP3A4启动子对CYP3A4基因的转录,且具有方向性和CYP3A4* 1G等位基因依赖性.

关键词：内含子、CYP3A4*1G、真核表达载体

所属期刊栏目：38

分类号：R394.6;R968

资助基金：国家自然科学基金资助项目81173127;河南省杰出青年基金资助项目074100510020;河南省教育厅基础研究基金资助项目13A310663;河南省科技厅基础与前沿技术研究计划基金资助项目142300410206;河南省科技攻关计划基金资助项目162102310523

在线出版日期：2017-06-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：13-17