10.3969/j.issn.1003-4706.2012.07.003
IRF4逆转录病毒表达载体的构建及鉴定
目的 将小鼠IRF4基因定向克隆入MSCV-IRES-GFP质粒,得到长期稳定表达IRF4的逆转录病毒载体.方法 以含IRF4cDNA质粒作为模板,PCR扩增所需目的片段;将该片段连接入MSCV-IRES-GFP质粒;以磷酸钙法转染293T细胞,收集病毒上清感染GP+E86细胞后,流式细胞术和蛋白印迹技术检测IRF4的表达.结果 经琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的片段成功连接到逆转录病毒MSCV载体上.逆转录病毒上清成功感染GP+E86细胞系.结论 成功构建了小鼠IRF4逆转录病毒表达载体,并实现了IRF4在GP+E86细胞系中的外源性表达.
IRF4、逆转录病毒载体、小鼠
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Q789(基因工程(遗传工程))
国家自然科学基金资助项目81060248;云南省自然科学基金资助项目2010CD084
2012-11-27(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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