重组蛋氨酸裂解酶原核体系的表达及纯化

摘要：

目的 建立L-蛋氨酸γ-裂解酶的原核表达、纯化体系.方法 合成Metase基因并构建重组质粒pBSK-Metase.通过分子克隆技术,构建重组表达质粒pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,并将重组子转化到感受态大肠杆菌Dh5α中.pGEX-4T-1-Metase经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导;pBV220-Metase经42℃温度诱导;并对诱导条件进行优化,获得大量表达;建立蛋氨酸裂解酶纯化体系.结果 构建出Metase基因的两种高效原核表达体系pBV220-Metase和pGEX-4T-1-Metase,并优化各自的最佳诱导表达条件;建立重组蛋氨酸裂解酶的纯化体系.结论 成功建立重组蛋氨酸裂解酶的原核表达、纯化体系;获得高效原核表达重组子pGEX-4T-1-Metase,且获得纯度高达95%的蛋氨酸酶.

关键词：重组、蛋氨酸裂解酶、表达、纯化

所属期刊栏目：33

分类号：Q812(生物工程学(生物技术))

资助基金：国家自然科学基金资助项目30760287;云南省科技厅自然科学基金资助项目2009CC022

在线出版日期：2012-10-15（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：3-7