腭裂相关基因TTF-2转基因小鼠载体的构建及体外表达

摘要：

目的 扩增及克隆C57BI/6j小鼠titf-2基因并利用小鼠骨髓间充质细胞进行表达.方法 从C57BL/6j小鼠肝脏组织中提取基因组DNA,用PCR从中扩增出titf-2基因片段.将titf-2基因片段插入载体pMD18-T中,经全自动序列分析仪测序正确后,再克隆至表达载体pBROAD3-mcs中,构建重组表达载体pBROAD3-mcs-titf-2,并转染小鼠骨髓间充质细胞进行表达.用羊抗鼠TTF-2多抗IgC对表达产物进行Western Blot签定.结果 DNA测序结果证实,获得titf-2基因片段,大小与理论值相符；Western Blot分析表明,表达出TTF-2约为4.2KDa大小的蛋白.结论 成功扩增、克隆titf-2基因,并在小鼠骨髓间充质细胞中得到表达,为下一步建立titf-2转基因小鼠模型奠定了基础.

关键词：TTF-2、克隆、Western Bloting

所属期刊栏目：32

分类号：R782(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金资助项目30171020

在线出版日期：2011-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：12-16