巢式RT-PCR检测E-cad mRNA相对含量的实验条件探讨

摘要：

目的 探讨巢式RT-PCR检测肺组织中E-cad mRNA相对含量的最适实验条件.方法 通过改变巢式RT-PCR反应体系各组分的浓度和反应条件,探讨巢式RT-PCR反应体系最适浓度和反应条件.结果 巢式RT-PCR反应体系为dNTP 200ìmol/L,MgCl2 1.5 mmol/L,引物600 nmol/L,Taq DNA聚合酶0.1 U/ìL,模板50 ng,10×反应缓冲液2.5ìL,总体系25ìL.反应条件为95℃预变性10 min,95℃1 min、66℃1min、72℃1 min,第2次PCR为35个循环,最后72℃延伸10 min.结论 建立了E-cad mRNA的相对定量检测方法.

关键词：巢式逆转录聚合酶链式反应、上皮钙粘蛋白、肺组织、mRNA

所属期刊栏目：29

分类号：R734.2(肿瘤学)

资助基金：昆明医学院第一附属医院院内资金资助项目2006yn05

在线出版日期：2008-11-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：28-32