PCR-RFLP法检测葡萄糖激酶基因启动子-30位点变异的实验条件研究

摘要：

目的:确定PCR扩增葡萄糖激酶基因启动子区以及用Alw21I内切酶切割-30位点的最佳实验条件.方法:对影响PCR反应以及酶切的实验因素进行系统研究.结果:最佳引物浓度为0.3μmol/L;以1 U酶量效果最满意;最适DNTP浓度为167μmol/L;最适镁离子浓度为1.5mmol/L 20μL的酶切体系中,最佳酶切产物为5μL,最佳内切酶量为5 U,酶切时间应超过9 h.以上参数偏离最适条件将会导致实验失败.

关键词：聚合酶链反应、葡萄糖激酶基因、RFLP、实验条件

所属期刊栏目：25

分类号：R446.112(诊断学)

资助基金：云南省卫生科研项目99Q032

在线出版日期：2004-07-22（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：48-52