甲基化酶DNMT3B基因敲除的CHO-K1细胞系构建

摘要：

构建敲除DNMT3B基因的细胞系,为重组蛋白药物生产使用的高效表达系统提供DNMT3B基因缺失的稳定细胞株.采用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建敲除DNMT3B基因的质粒,并利用脂质体转染CHO-K1细胞进行基因编辑、T7E1核酸内酶切及筛选DNMT3B基因敲除细胞,以及软琼脂法获得单克隆.结果表明,通过对获得的单细胞克隆进行测序比对,确定DNMT3B基因第4个外显子处被编辑产生移码突变.最终获得DNMT3B基因特异位点删除的CHO细胞单克隆.

关键词：CRISPR/Cas9;基因敲除;DNMT3B;表观遗传学;T7E1核酸内切酶

所属期刊栏目：43

分类号：R782.6(口腔科学)

资助基金：国家自然科学基金;云南省地方高校联合基金;云南省教育厅科学研究基金资助项目

在线出版日期：2021-12-24（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：114-119