一种新的人端粒相关蛋白T-STAR 的克隆及功能分析

摘要：

目的筛选、鉴定新的人端粒相关蛋白,为进一步了解端粒酶全酶的结构、生物学功能及其作用机制奠定实验基础. 方法采用研究蛋白质间相互作用非常有效的分子生物学方法酵母双杂交技术、哺乳细胞双杂交技术进行人端粒相关蛋白分子的筛选、鉴定. 结果成功构建端粒酶催化亚单位诱饵融合蛋白表达载体pGBKT7-hTERT,无自身激活活性,pGBKT7-hTERT融合蛋白在酵母细胞AH109内有效稳定表达.以pGBKT7-hTERT为诱饵进行cDNA文库筛选,将阳性克隆质粒cDNA测序,同源性比较获得了已收录人cDNA序列T-STAR.成功构建真核表达载体pVP16-T-STAR、pM-hTERT, 证明T-STAR 与hTERT在哺乳细胞内发生相互作用.T-STAR mRNA在正常胃粘膜组织低表达,在胃癌细胞内高表达. 结论 T-STAR是人端粒相关蛋白新成员,可能参与酪氨酸蛋白激酶信号传递并通过介入hTERT的磷酸化或去磷酸化调节端粒酶的活性.

关键词：端粒、末端转移酶、酵母菌、杂交

所属期刊栏目：19

分类号：R329.25;R329.28;R379;R394(人体形态学)

资助基金：国家自然科学基金30070043

在线出版日期：2004-01-08（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：68-71