亮氨酸对乳蛋白合成影响及其机制的研究

摘要：

该研究旨在探讨其他氨基酸缺乏条件下补充亮氨酸对体外培养的奶牛乳腺上皮细胞κ-酪蛋白基因表达和κ-酪蛋白合成的影响以及细胞增殖的影响，并从mRNA水平探究了mTOR信号通路介导的乳腺上皮细胞内蛋白质合成的重要性。为创造细胞氨基酸缺乏环境，将DMEM/F12培养基稀释100倍作为对照组，处理组1在对照组的基础上补充亮氨酸，处理组2在处理组1的基础上添加对mTOR信号通路上游PI3K起抑制作用的LY294002抑制剂，分别采用实时荧光定量PCR技术和酶联免疫法测定基因的相对表达量和蛋白合成量，采用CCK-8法测定细胞增殖。结果发现，在其他氨基酸缺乏的条件下，单独的亮氨酸显著促进了κ-酪蛋白基因表达和κ-酪蛋白合成，而添加抑制剂极显著降低了亮氨酸的这种作用；蛋白质合成信号通路相关的基因mTOR、S6K1、eIF4E、eEF2相对表达量均以处理组1最高，处理组2最低，但除了eEF2基因外，其他基因在各组间差异不显著；4EBP1的基因以处理组1最高，对照组最低；补充亮氨酸没有显著促进乳腺上皮细胞增殖，但添加抑制剂可显著抑制细胞增殖。结果表明，在其他氨基酸缺乏的条件下给奶牛乳腺上皮细胞单一补充亮氨酸能显著促进κ-酪蛋白的合成，这种作用可能与mTOR信号通路介导蛋白质合成有关，此外，研究也表明mTOR信号通路可调控奶牛乳腺上皮细胞的增殖。

关键词：乳腺上皮细胞、CSN3、κ-酪蛋白、mTOR、基因表达、细胞增殖

所属期刊栏目：13

分类号：R3 ;R9

在线出版日期：2016-08-04（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共2页

页码：163-164