舞毒蛾 Ldcht10基因序列的克隆及其功能分析

摘要：

【目的】研究舞毒蛾 Lymantria dispar 几丁质酶基因的时空表达特性及其在蜕皮发育过程中的生物学功能，筛选在舞毒蛾发育过程中致死性的几丁质酶基因，为实现基于 RNAi 的舞毒蛾有效控制提供重要的基础数据。【方法】设计简并引物克隆舞毒蛾几丁质酶基因 Ldcht10关键序列，通过使用实时荧光定量 PCR 方法检测该基因在舞毒蛾不同龄期与组织中的相对表达量，选取部分序列的双链 RNA（dsRNA）研究该基因功能。【结果】本研究克隆了长度为2057 bp 的舞毒蛾几丁质酶基因 Ldcht10序列；各组织与不同龄期 RT-PCR 结果表明 Ldcht10的时空表达特性存在明显差异，Ldcht10在各个龄期均表达活跃且在前肠与后肠中的表达水平最高；Ldcht10的 RNA 干扰试验表明：注射 Ldcht10 dsRNA 后 Ldcht10的表达受到极大抑制，该基因被沉默后24.3%的舞毒蛾幼虫因无法完成蜕皮或化蛹而死亡。【结论】舞毒蛾中几丁质酶基因 Ldcht10在各个龄期与组织中的表达存在差异，且在舞毒蛾蜕皮过程中具有十分重要的生物学功能，该基因被沉默后部分舞毒蛾因无法完成蜕皮而导致死亡。

关键词：舞毒蛾、几丁质酶、实时荧光定量 PCR、RNA 干扰

分类号：S76;S43

资助基金：国家自然科学基金项目31101490

在线出版日期：2015-11-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：1195-1202