利用噬菌体展示技术筛选Cry2Ab毒素受体表位的方法

摘要：

苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)产生的内毒素具有杀虫活性,Cry2Ab毒素作为Bt棉花的杀虫活性蛋白,其在靶标昆虫体内的结合受体及作用位点尚不清楚,本研究采用噬菌体展示( phage display)的方法,经4轮的“吸附-洗脱-扩繁”筛选,并对阳性克隆所携带的外源DNA片段进行序列测定后,得到2段能够与活化Cry2Ab毒素相互作用的多肽序列,通过酶联免疫结合试验(ELISA)进一步证明,这2段多肽序列与活化Cry2Ab毒素具有较高的亲和力和特异性,结果表明,利用该方法能够由噬菌体随机肽库中高效捕获亲和序列,筛选到与活化Cry2Ab毒素具有高亲和力的多肽,该序列可以模拟Cry2Ab毒素的受体表位,为进一步研究Cry2Ab毒素作用机制奠定了基础,并为今后田间抗性基因频率检测,以及毒素-受体作用机制研究工作提供更有力的技术支持.

关键词：噬菌体展示、表位筛选、Cry2Ab

所属期刊栏目：49

分类号：Q96(昆虫学)

资助基金：国家重点基础研究发展计划2007CB109204

在线出版日期：2012-12-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：1397-1405