10.3969/j.issn.0452-8255.2009.03.010
不同赤眼蜂品系ISSR-PCR条件优化及分子鉴定
赤眼蜂Trichogramma不同品系在寄生能力等生物学特性上存在差异,而这些差异可能被用于优良品系的筛选.通过优化影响赤眼蜂不同品系ISSR-PCR的主要参数,建立适于鉴别赤眼蜂不同品系的ISSR-PCR反应体系和扩增程序.在20 μL反应体系中,各反应物的最适含量为10×PCR Buffer 2.0μL,MgCl2 2.0 μL(25 mmol/L),dNTPs 1.6 μL(2.5 mmol/L each),正反向引物各1 μL(25 μmol/L),DNA模板1.0 μL,Taq酶0.4 μL(2.5 U/μL),和ddH2O.ISSR-PCR的扩增程序为:95℃预变性5 min,94℃变性50 s,52℃退火1 min,72℃延伸1 min 20 s,35个循环,72℃延伸10 min.结果表明,在上述优化条件下,采用ISSB-PCR可实现对7个赤眼蜂优良品系的分子鉴定.该研究对于赤眼蜂优良品系的筛选具有潜在的应用价值.
赤眼蜂、ISSR-PCR、品系鉴定和筛选
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S47;S56
北京市自然科学基金项目6072009;国家"十一五"科技支撑项目2006BAD08A06-02
2009-06-12(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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