朱砂叶螨HSP90基因克隆及原核表达

摘要：

采用RT-PCR及RACE技术克隆朱砂叶螨Tetranychus cinnabarinus的热激蛋白90(HSP90)基因, 并进行序列分析, 得到一条长2 595 bp的cDNA序列, 该序列开放阅读框(open reading frame, ORF)为2 169 bp, 编码722个氨基酸, 分子量约为83.45 kDa, 理论等电点为4.81, 3′非编码区(untranslated region, UTR)为249 bp, 5′UTR为177 bp.通过Antheprot分析发现5个HSP90家族的签名序列及胞质HSP90特征序列MEEVD.同源性分析表明, 朱砂叶螨HSP90编码区核苷酸序列和其他已知的HSP90, 尤其是节肢动物昆虫的HSP90, 具有很高的相似性.将鉴定正确的原核重组表达质粒pET43a-TcHSP90, 转化大肠杆菌Escherichia coli BL21(origami) 进行原核表达, 应用SDS-PAGE和Western blotting技术分离并检测融合蛋白, 结果表明构建的原核表达质粒可以在宿主菌中稳定、正确表达.朱砂叶螨TcHSP90基因的克隆、原核表达, 为进一步研究HSP90的性质和功能的研究提供有用的实验材料.

关键词：朱砂叶螨、热激蛋白90、基因克隆、序列同源性分析、原核表达

所属期刊栏目：52

分类号：Q966(昆虫学)

资助基金：国家自然科学基金项目30600059

在线出版日期：2010-10-29（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：845-851