10.3969/j.issn.1006-3188.2022.04.004
水产品中苯甲酸快速检测单克隆抗体的制备
[目的]构建水产品中苯甲酸快速检测单克隆抗体.[方法]采用1,4-丁二醇二缩甘醚把半抗原和载体蛋白进行了偶联制备了免疫原;用戊二醛法制备了包被原,紫外光谱法对改造的抗原进行了初步鉴定,以BA-OVA为包被原,筛选出4株分泌抗BA抗体的杂交瘤细胞并通过动物免疫试验进一步验证;采用体内诱生法制备单抗腹水,并用辛酸-硫酸铵法和DEAE纤维素柱进行纯化;对获得的单克隆抗体进行亚型鉴定.[结果]建立间接ELISA和间接竞争ELISA法对血清多克隆抗体的效价和特异性进行了测定.经测定,单克隆抗体腹水效价为l:5~20×l04,其中1株抗体(J5F4)对苯甲酸的IC50为225.3 ng/mL;同苯酚、苯甲醇的交叉反应率分别为9.57%和6.30%,得到的抗体特异性较好,可以应用于免疫学检测中.[结论]制作的改造抗原偶联是成功的,并且利用小鼠免疫方案具有很好的可行性,为下一步试纸条的生产打下了坚实的基础.
水产品、苯甲酸、快速检测、单克隆抗体
X592
2022-09-05(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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