烟草 RNA提取方法的优化及冰盒储存时间的探讨

摘要：

烟草作为一个模式植物在分子生物学研究中发挥着重要的作用，其总RNA的提取是后续分子生物学研究的前提和关键之一。针对过柱型的RNA提取试剂盒在有效的清除烟草中糖类、蛋白质及次生代谢物的同时，影响了RNA产量和浓度，以及远距离携带液氮取材困难的问题，设置不同提取方法和冰盒不同储运时间处理，对天根RNA simple总RNA提取试剂盒进行了优化，并对冰盒贮存烟叶时间与RNA提取质量的关系进行了探讨。结果表明：优化试剂盒法获得了高浓度高质量的烟草总RNA。经琼脂糖电泳检测，利用该方法提取的烟草总RNA，条带清晰、无拖尾现象，28S与18S 的比例约为2∶1。紫外吸收值的测定表明，所提取的烟草总RNA的A 260/A 280的值在1．8～1．9，浓度显著高于原方法；而冰盒能在5 h内保证所取样品RNA 的完整性，适宜于短途运输储存。

关键词：烟草、RNA提取、优化试剂盒法、冰盒储存、RT-PCR

分类号：S570

资助基金：贵州省烟草专卖局公关项目黔烟科201102号;贵州大学研究生创新基金项目研农2013014;贵州省烟草公司项目黔烟科合201302

在线出版日期：2014-07-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：495-500