腈水合酶/酰胺酶体系制备蛋氨酸羟基类似物

摘要：

西洼湖戈登氏菌CGMCC 4.218 4含有一个高效的腈水合酶/酰胺酶体系.本文利用该菌株全细胞中的腈水合酶(Nitrile hydratas)催化2-羟基-4-甲硫基丁腈(HMTBN)水合为2-羟基-4-甲硫基丁酰胺(HMTBAm),利用酰胺酶(Amidase)以原位串联的方式将2-羟基-4-甲硫基丁酰胺水解为2-羟基-4-甲硫基丁酸(HMTBA,蛋氨酸羟基类似物).考察了底物浓度、细胞质量浓度、温度、pH、反应时间对腈水合酶和酰胺酶活性的影响,对腈水合酶、酰胺酶的热稳定性和pH稳定性进行了测定.结果表明,最优的反应条件为:50 mmol/L HMTBN,3 g/L干重细胞,温度30 ℃,pH=8.0,反应时间30 min.在最优反应条件下,采用分批补料策略,细胞可使用23批次,HMTBA的累积量在44 h内达到164 g/L,其产率为95%.

关键词：腈水合酶、酰胺酶、2-羟基-4-甲硫基丁腈、2-羟基-4-甲硫基丁酰胺、蛋氨酸羟基类似物、生物工程

所属期刊栏目：34

分类号：Q814.9(生物工程学(生物技术))

在线出版日期：2017-08-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：780-785