黑曲霉中生物合成赭曲霉毒素A的非核糖体肽合成酶基因的鉴定

摘要：

赭曲霉毒素A (ochratoxin A,OTA)是国际癌症研究机构认定的“2B”类致癌物.黑曲霉Aspergillus niger是美国食品药品监督局认可的食品安全菌.然而近年来陆续发现某些黑曲霉菌株能够产生OTA,这会对人类健康构成潜在威胁.阐明黑曲霉生物合成OTA的关键基因有助于理解OTA生物合成机制,这对OTA污染的防控具有重要意义.本研究克隆了产OTA黑曲霉中非核糖体肽合成酶(NRPS)编码基因(An15g07910),并对其进行了生物信息学分析,在此基础上采用同源重组的方法敲除了该基因,获得了一株性能稳定的敲除突变株Δnrps.与野生株相比,Δnrps突变株的表型在CYA培养基中并无明显改变,但在7d培养期间完全失去了合成赭曲霉毒素α(ochratoxin α,OTα)和OTA的能力,而赭曲霉毒素β(ochratoxin β,OTβ)的合成不受影响.在野生株培养过程中,该nrps基因前4d表达量逐渐增大,并在第4天达到最高,随后基因表达量逐渐下降并趋于稳定,这与OTA的含量变化基本一致.结果 表明该nrps 基因(An15g07910)参与OTA的生物合成,其编码的NRPS可能负责催化苯丙氨酸部分和二氢异香豆素部分的交联.

关键词：黑曲霉、赭曲霉毒素A、非核糖体肽合成酶、基因敲除、实时定量PCR、高效液相色谱

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资助基金：国家自然科学基金;山东省重点研发计划

在线出版日期：2020-06-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共10页

页码：556-565