基于PEG介导原生质体转化构建粉红聚端孢荧光标记

摘要：

粉红聚端孢是多种植物的重要病原菌.本研究通过酶解粉红聚端孢幼嫩菌丝细胞壁获得原生质体,用PEG介导原生质体转化将携带GFP基因和博来霉素抗性基因的外源DNA随机插入粉红聚端孢基因组,共获得博来霉素抗性菌株90株,转化效率达18个/μg.选取22株转化子荧光观察,发现均可表达荧光,菌株间荧光强度不同,其中10株转化子荧光表达较强.与野生型相比,突变菌株TR45的菌落生长、产孢量和致病力等生物学特性均未改变,在不含博来霉素的培养皿中继代培养10代荧光仍能稳定表达.本研究构建的高效原生质体制备和PEG介导粉红聚端孢遗传转化方法,可用于该菌基因功能研究,绿色荧光标记菌株可用于病菌侵入、田间监测、侵染循环等发生规律研究.

关键词：遗传转化、绿色荧光蛋白、原生质体制备、苹果、心腐病

所属期刊栏目：38

资助基金：国家自然科学基金31772113;国家苹果产业技术体系CARS-27

在线出版日期：2019-03-19（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共8页

页码：90-97