人热休克蛋白B6的真核蛋白表达与生物学功能
目的 构建人热休克蛋白B6 (HspB6)重组表达载体,初步研究其生物学活性.方法 采用RT PCR法扩增HspB6 CDS段序列,并将扩增产物与小鼠Fc片段融合成重组基因HspB6/mFc,测序正确后插入蛋白表达载体pCEP4,随后转染人肾上皮293T细胞.扩增培养后收集细胞上清液用于浓缩、纯化以及Western blot验证.采用CCK-8法和Transwell实验分别检测HspB6/mFc融合蛋白对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖和迁移的影响.结果 成功构建pCEP4/HspB6/mFc重组载体,并获得稳定表达HspB6/mFc融合蛋白的293T细胞.HspB6/mFc融合蛋白能明显促进HUVEC增殖和迁移.结论 pCEP4/HspB6/mFc重组载体及稳定表达的HspB6/mFc融合蛋白为进一步研究HspB6的生物学功能提供物质基础.
热休克蛋白B6、真核表达、融合蛋白
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R392
国家自然科学基金81200727;苏州大学校青年基金Q312203010
2014-11-17(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
2109-2111