人腹膜间皮细胞的体外培养及Ⅰ型胶原、TGF-β1表达的检测
目的 建立人腹膜间皮细胞(hPMCs)体外培养模型,并检测hPMCs中Ⅰ型胶原和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达.方法 用0.2%胰蛋白酶-0.02%乙二胺四乙酸二钠消化人大网膜组织,进行hPMCs原代培养并传代.采用形态学及免疫组化方法对培养细胞进行鉴定,RT-PCR检测hPMCs中Ⅰ型胶原和TGF-β1 mRNA表达.结果 原代hPMCs在光镜下呈成串葡萄样,融合后形成铺路鹅卵石样外观;电镜下可见细胞表面存在大量微绒毛,细胞浆内有丰富的内质网和线粒体.免疫组化鉴定细胞抗角蛋白抗原、抗波形蛋白抗原阳性,抗白细胞CD45抗原和抗第Ⅷ因子相关抗原阴性.hPMCs亦表达Ⅰ型胶原和TGF-β1 mRNA.结论 胰蛋白酶消化法是一种简单实用分离hPMCs的方法,可为进一步研究腹膜纤维化的防治及Ⅰ型胶原、TGF-β1在腹膜透析中的作用提供理论依据.
腹膜间皮细胞、Ⅰ型胶原、转化生长因子β1
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R331(人体生理学)
2013-11-14(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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