沉默Oct4和Nanog基因抑制胰腺癌干细胞的生物学特征

摘要：

目的 探讨特异短发夹RNA(shRNA)沉默胰腺癌PANC-1肿瘤干细胞(PCSCs)生物学特征的变化及其机制.方法 从PANC-1细胞株中分离出CD44+ CD24+上皮特异性抗原(ESA)+ PCSCs,检测Oct4和Nanog蛋白表达.用慢病毒载体介导的shRNA沉默PCSCs中Oct4和Nanog表达,用荧光定量RT-PCR和Western blot检测干扰效率.通过单克隆形成实验、Transwell小室模型、细胞计数试剂盒8(CCK8)检测Oct4和Nanog对PCSCs增殖、迁移、侵袭和药物敏感性的影响.NOD/SCID小鼠致瘤实验观察Oct4和Nanog对PCSCs致瘤性的影响.结果 PANC-1细胞株中PCSCs占0.1％-0.8％,Oct4和Nanog在PCSCs中呈高表达(P＜0.05)；慢病毒载体介导的shRNA降低PCSCs中Oct4和Nanog的表达(P＜0.05).沉默Oct4、Nanog后,PCSCs的单克隆形成、增殖、迁移、侵袭能力下降,药物敏感性增强并诱导凋亡(P＜0.05).致瘤实验表明,沉默Oct4和Nanog后,PCSCs致瘤能力下降(P＜0.05).结论 Oct4和Nanog在PCSCs中高表达,慢病毒介导的shRNA可沉默PCSCs中Oct4、Nanog的表达.沉默PCSCs中Oct4和Nanog的表达可抑制PCSCs相关生物学特征,增强其药物敏感性并诱导细胞凋亡.

关键词：胰腺癌、肿瘤干细胞、干性基因、基因沉默

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分类号：R735(肿瘤学)

资助基金：国家自然科学基金81101615、81070656;中国博士后基金2012M521107;江苏省自然科学基金BK2010276

在线出版日期：2013-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：2109-2113,封3