小鼠miR-125b慢病毒过表达载体构建与鉴定

摘要：

目的 构建小鼠胰腺β细胞NIT-1中miR-125b慢病毒过表达载体.方法 从小鼠基因组DNA中用PCR扩增miR-125b的前体序列,经Nhe Ⅰ和PstⅠ酶切后连接到Lv-CMV-GFP载体中,并对重组质粒进行双酶切鉴定和测序分析.将miR-125b过表达载体、pVSV-G和delta8.91质粒共转染293T细胞,收获慢病毒感染NIT-1细胞,流式细胞术分选阳性细胞,RT-PCR鉴定稳转细胞株中miR-125b的表达.结果 成功构建了miR-125b慢病毒表达载体,感染小鼠胰腺β细胞NIT-1后能够成功过表达miR-125b.结论 成功构建miR-125b慢病毒过表达载体,为进一步研究其功能建立了实验基础.

关键词：miR-125b、慢病毒过表达载体、胰腺β细胞

所属期刊栏目：39

分类号：R392

资助基金：江苏省高校优势学科建设工程

在线出版日期：2013-09-16（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共4页

页码：1616-1618,封2