PML-RARα245与hGM-CSF双基因DNA疫苗的构建与表达

摘要：

目的 采用长度为245 bp的急性早幼粒细胞白血病PML-RARα融合基因片段构建新的PML-RARα与hGM-CSF真核双表达载体.方法 用RT-PCR技术从NB4细胞的RNA中扩增长度为245 bp的PML-RARα基因片段,PCR技术从pORF-hGM-CSF质粒中扩增出hGM-CSF基因,分别将两基因片段连接到pIRES质粒的多克隆位点A和B中,构建真核双表达载体.用酶切和序列分析方法验证所构建载体的正确性.将重组质粒转染K562细胞,利用RT-PCR和点杂交技术检测重组质粒在真核细胞中的转录和翻译情况.结果 双酶切结果证明重组质粒中含有相应大小的PML-RARα基因片段及hGM-CSF基因,序列分析证明重组质粒中插入片段的碱基序列完全正确.该重组质粒能够在真核细胞中正常转录和翻译.结论 成功构建了含有PML-RARα245及hGM-CSF的双表达载体,为筛选合适的抗原片段用于构建治疗急性早幼粒细胞白血病的PML-RARαDNA疫苗提供重要资料.

关键词：PML-RARα融合基因、hGM-CSF基因、急性早幼粒细胞白血病、DNA疫苗

所属期刊栏目：39

分类号：R733(肿瘤学)

资助基金：广东省科技计划2005B50301016;广东省医学科研基金A2012757;惠州市科技计划2011Y202

在线出版日期：2013-07-01（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：878-881,封2