miR-21慢病毒干扰载体的构建及其对胆管癌细胞增殖和迁移能力的影响

摘要：

目的 构建miR-21慢病毒干扰载体,并观察其对胆管癌细胞增殖和迁移能力的影响.方法 针对目标序列,设计2条合适的PCR引物进行退火得到插入片段序列.将慢病毒干扰载体双酶切,纯化后与退火产物进行定向连接,产生慢病毒干扰质粒和阴性对照质粒,将其与慢病毒包装质粒混合物共转染293T,包装产生慢病毒.使用收获的慢病毒感染胆管癌细胞HUCCT1,荧光显微镜观察感染效率,细胞增殖和划痕实验分别检测HUCCT1下调miR-21后细胞增殖能力和迁移能力的改变.结果 成功构建了miR-21慢病毒干扰载体.感染胆管癌细胞HUCCT1后,miR-21表达降低;下调miR-21(LV-anti-miR21)组和感染空白慢病毒载体(LV-GFP)组相比,LV-anti-miR21组增殖能力和迁移能力均明显下降(P＜0.05).结论 成功构建miR-21慢病毒干扰载体;下调miR-21能够抑制胆管癌细胞的增殖,降低胆管癌细胞的迁移能力.

关键词：胆管癌、miR-21、慢病毒

所属期刊栏目：38

分类号：R394

在线出版日期：2013-01-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：2646-2649,封3