ERK2的CC区域在HeLa细胞中的定位作用

摘要：

目的 探索细胞外调节蛋白激酶2(ERK2)的coiled-coil(CA3)区域在表皮生长因子(EGF)所诱导的HeLa细胞中的定位作用.方法 用定点突变试剂盒删除ERK2的盘绕结构[ERK2(del CC)],免疫共沉淀的方法检测ERK2(del CC)在EGF刺激的条件下和G蛋白耦联受体激酶相互作用分子1(GIT1)的相互关系,免疫荧光染色检测ERK2(del CC)在细胞内的位置以及和GIT1的相互关系.结果 成功删除ERK2的CA3区域;免疫共沉淀结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了ERK2和GIT1在EGF刺激条件下的相互结合;免疫荧光染色结果显示,删除ERK2的CC区域显著抑制了磷酸化的ERK2在细胞局部黏附内的定位.结论 在EGF的刺激条件下,增加了ERK2和GIT1的相互结合,ERK2的CC区域是与GIT1相互结合的重要区域.删除ERK2的CC区域不仅显著抑制了ERK2和GIT1的相互结合,而且明显降低ERK2在细胞局部黏附内的定位.

关键词：细胞外调节蛋白激酶2、G蛋白耦联受体激酶相互作用分子1、细胞迁移

所属期刊栏目：37

分类号：R340(人体生物化学、分子生物学)

资助基金：江苏省兴卫工程基金RC2007059

在线出版日期：2011-07-05（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页码：630-632,封2