腺病毒载体介导shRNA抑制生存素对PC-3细胞的影响
目的 运用RNA干扰(RNAi)技术抑制雄激素非依赖前列腺癌细胞株(PC-3)中生存素的表达,检测生存素抑制对PC-3细胞的影响.方法 构建负载生存素短发夹RNA(shRNA)且携带绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒,体外转染PC-3细胞.MTT法监测细胞增殖活性,流式细胞术检测凋亡率,RT-PCR和Western blot分别对生存素mRNA及其蛋白表达进行测定.结果 负载生存素shRNA重组腺病毒构建成功;转染96h后,PC-3细胞增殖受到抑制,并可诱导出PC-3细胞凋亡,凋亡率达到(14.43±0.57)%,生存素mRNA及其蛋白的表达强度分别降低了(72.23±1.11)%和(71.75±2.64)%,与阴性对照组及空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论 腺病毒载体介导的生存素shRNA可有效地抑制PC-3细胞中生存素的表达,RNAi结合腺病毒载体系统抑制生存素表达有望成为治疗雄激素非依赖前列腺癌的有效方式之一.
前列腺癌、生存素、腺病毒
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R737(肿瘤学)
江苏省自然科学基金BK2008167;2008年苏州市科技发展计划社会发展及医药项目
2010-09-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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