10.13668/j.issn.1006-9070.2015.03.004
发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒非结构蛋白 NSs的原核表达及初步鉴定
目的:克隆、表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV)非结构蛋白 NSs,对其功能初步鉴定。方法采用 PCR 法扩增经密码子优化后的 SFTSV NSs 基因,并克隆至 PGEX-4T-2载体中,构建原核表达载体 PGEX-4T-2-NSs,经酶切、测序鉴定后转化表达菌 BL21(DE3),再经诱导、纯化得到谷胱甘肽 S-转移酶(GST)-NSs 融合蛋白,用 Western Blot 验证融合蛋白 GST-NSs 的抗原性。结果成功构建了 GST-NSs 融合蛋白原核表达载体,并在 BL21细菌中获得高效表达;纯化后的融合蛋白具有良好的抗原性。结论实现了 SFTSV 重组 NSs 蛋白的原核高效表达,为进一步深入研究其结构与功能奠定了基础。
发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV)、非结构蛋白(NSs)、原核表达、功能鉴定
R-33(医学研究方法)
国家科技重大专项2013ZX09102029;江苏医学重点人才基金项目RC2011082;江苏省科技支撑项目BE2012768
2015-06-04(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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