10.3969/j.issn.1006-9070.2013.01.002
发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒Gn和Gc蛋白的分段表达
目的 分段表达发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒(SFTSV) Gn和Gc蛋白.方法 采用PCR方法克隆了SFTSV Gn和Gc基因上三段相互重叠的基因片段Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3,将PCR产物分别连接到原核表达载体pET28a(+)上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),将其分别转化感受态菌BL21,IPTG诱导表达,通过Western blot鉴定Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2、Gc3蛋白的表达.结果 成功构建重组质粒pET28a-Gn(Gn1)、pET28a-Gn(Gn2)、pET28a-Gn(Gn3)、pET28a-Gc(Gc1)、pET28a-Gc(Gc2)、pET28a-Gc(Gc3),Western blot可见Gn1、Gn2、Gn3、Gc1、Gc2和Gc3编码蛋白的成功表达.结论 Gn和Gc蛋白的分段表达成功,为进一步深入研究SFTSV的Gn和Gc蛋白结构与功能及精确定位其抗原表位奠定了基础.
发热伴血小板减少综合征布尼亚病毒、Gn和Gc蛋白、分段表达
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R-33(医学研究方法)
江苏医学重点人才基金项目RC2011082
2013-03-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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