斑马鱼Tph1a蛋白表达、纯化及对脂代谢基因的影响

摘要：

对斑马鱼色氨酸羟化酶1a(Tph1a)进行原核表达、纯化,探究其在斑马鱼脂代谢中的作用.根据大肠埃希菌的偏爱密码序列,优化斑马鱼tph1a编码区,插入原核表达载体pET-28a,构建融合蛋白表达质粒,并诱导表达、纯化和复性后,腹腔注射斑马鱼,检测其对脂代谢基因表达的影响.结果表明:重组蛋白Tph1a表达形式为包涵体;纯化和复性后的蛋白质具有57 ku的特异性条带;腹腔注射复性蛋白后,高脂组斑马鱼acc、pgc1a基因等表达上调,lpl基因表达下调,且pgc1a基因的表达丰度远高于其他脂代谢基因.这一研究成功构建了原核表达载体pET-28a-tph1a,获得体外高效表达;该蛋白质不仅诱导肥胖斑马鱼的长链脂肪酸合成阻滞,更促进脂肪酸氧化与分解,为探究Tph1a在鱼类脂代谢调控中的功能奠定了基础.

关键词：斑马鱼、Tph1a蛋白、原核表达、脂代谢基因

所属期刊栏目：42

分类号：Q78(基因工程（遗传工程）)

资助基金：江苏省高校自然科学基金面上项目;江苏省"双创博士"基金资助项目;江苏省自然科学基金青年基金项目;江苏省海洋生物技术重点实验室开放课题;江苏省高校大学生创新创业训练计划项目;连云港市"海燕计划"项目

在线出版日期：2021-08-11（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：61-67