猪鼻支原体3-磷酸甘油醛脱氢酶表达及黏附细胞功能研究

摘要：

利用原核表达载体pET-28a(+)构建猪鼻支原体(Mycoplasma hyorhinis,Mhr)的3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)重组表达菌,研究GAPDH黏附宿主细胞的功能.结果 表明:成功构建了表达rMhr-GAPDH的重组工程菌,利用IPTG诱导蛋白表达,镍柱亲和层析纯化,成功获得高纯度的rMhr-GAPDH重组蛋白.用重组蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,对Mhr液体培养物和固体菌落进行免疫杂交,均可检测到GAPDH,提示其可表达于菌体表面.将rMhr-GAPDH蛋白与人气道上皮细胞NCI-H292共孵育,利用间接免疫荧光试验可检测到黏附在细胞上的重组蛋白,利用微孔板黏附试验进一步证明rMhr-GAPDH蛋白与细胞膜蛋白的结合具有剂量依赖性,并可为其抗体所抑制.该研究构建表达和纯化了Mhr的GAPDH重组蛋白,检测到其在菌体表面的表达,并证明其具有黏附细胞能力,这有助于进一步研究Mhr黏附感染的致病机制.

关键词：猪鼻支原体、3-磷酸甘油醛脱氢酶、细胞黏附

所属期刊栏目：41

分类号：S855(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省"六大人才高峰"高层次人才项目;江苏省自然科学基金;江苏省自然科学基金

在线出版日期：2020-07-27（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：16-20,36