表达羊口疮病毒B2L基因重组腺病毒的构建及鉴定

摘要：

为构建表达羊口疮病毒(ORFV)B2L基因的重组腺病毒,提取实验室保存的ORFV AH-F10临床分离株的病毒核酸,PCR扩增B2L基因,将其克隆至穿梭载体中,再将重组穿梭质粒pHBAd-ORFV-B2L与骨架载体质粒pHBAd-BHGlox△E1利用脂质体共转染HEK293细胞,转染后48 h收获包装成功的重组腺病毒rAd-ORFV-B2L,对rAd-ORFV-B2L进行病毒滴度测定及遗传稳定性鉴定.结果表明:构建获得的重组腺病毒rAd-ORFV-B2L病毒滴度达到1079TCID50·μL-1.Western-blot检测结果表明rAd-ORFV-B2L在体外能够表达B2L蛋白,且能够与ORFV多抗血清发生特异性反应.RT-PCR检测结果表明,连续传代的rAd-ORFV-B2L能够稳定表达外源蛋白B2L.该研究为后续腺病毒疫苗的动物保护试验奠定基础.

关键词：羊口疮病毒、B2L基因、重组腺病毒、构建、鉴定

所属期刊栏目：38

分类号：S852.65+9.1(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;安徽省自然科学基金;安徽农业大学稳定;引进人才科研项目

在线出版日期：2017-12-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：6-10