结核分枝杆菌RpfE蛋白的原核表达及鉴定

孙林李求春潘志明焦新安霍如松

扬州大学;

摘要：

以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,PCR扩增复活促进因子E(rpfE)基因,并将其克隆到表达载体pET-32a(+)中,重组表达质粒pET32a-rpfE转化E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE结果显示目的蛋白在细菌裂解上清和沉淀中均有表达,进一步对可溶表达的蛋白通过镍柱亲和纯化,获得高纯度的重组蛋白.Western-blotting试验结果表明:重组RpfE蛋白能与兔抗H37Rv多抗血清发生特异反应,具有良好的反应原性.这为探索RpfE蛋白在结核病疫苗开发和新型诊断试剂研制等奠定基础.

关键词：结核分枝杆菌、RpfE蛋白、原核表达、鉴定

所属期刊栏目：35

分类号：S852.61+8;R378.91(动物医学（兽医学）)

在线出版日期：2014-06-30（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

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