柔嫩艾美耳球虫YZ株SO7基因的克隆与序列分析

摘要：

对柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella) YZ株折光体SO7基因进行克隆,并对其核苷酸及氨基酸进行序列分析.以纯化的发育7 h的E.tenella YZ株卵囊孢子提取的总RNA为模板,设计特异性引物,应用两步法RT-PCR技术扩增出SO7基因特异性片段.将扩增出的片段插入pUCm-T载体,随机选择经蓝白斑筛选、PCR及酶切鉴定为阳性的两个克隆分别进行测序分析,并对结果进行验证.结果表明: 两个阳性克隆所含插入片段的DNA序列完全一致,含全长为651个核苷酸的开放阅读框,富含AGC和CTG重复序列,编码区核苷酸与LS18株和BJ株的同源性都为99.5%,与HB株同源性为99.4%,与GD株同源性为99.7%.其推测的氨基酸序列与LS18株和GD株的同源性都为99.1%,与BJ和HB株同源性为98.6%.通过对其蛋白抗原性、表面可能性、亲水性、柔性区、二级结构等参数预测表明,YZ株核苷酸的变异未引起其蛋白主要特性和B细胞表位的变化.该结果为研制E.tenella的基因工程疫苗奠定了基础.

关键词：柔嫩艾美耳球虫、SO7基因、克隆、序列分析

所属期刊栏目：27

分类号：S852.72+3(动物医学（兽医学）)

资助基金：江苏省高校自然科学基金NK0310078;扬州大学校科研和教改项目2004-10;扬州大学校科研和教改项目NK0413171

在线出版日期：2006-11-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：10-14