猪CD205分子CysR-FN Ⅱ截短基因的克隆表达及应用

摘要：

为克隆表达编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因片段,并验证其生物学活性,提取了猪淋巴组织总RNA,并合成cDNA,利用PCR方法扩增编码猪CD205分子的CysR-FNⅡ截短基因,构建pET-32a-CysR-FNⅡ原核重组表达质粒,转化至大肠杆菌BL21,分别进行诱导表达与蛋白质纯化,利用制备的目的蛋白免疫小鼠获得多克隆抗体,经间接免疫荧光试验和流式细胞分析鉴定.SDS-PAGE与Western Blot鉴定结果显示,目的蛋白以可溶性形式表达,大小约4.0×104,与理论值一致.一次免疫后14 d抗体效价达1:3200.间接免疫荧光试验和流式分析结果显示,获得的多克隆抗体可与猪骨髓来源树突状细胞发生特异性结合.说明该重组表达蛋白质具有相应的生物学活性,可用于猪CD205抗原靶向研究.

关键词：猪、CD205、CysR-FN Ⅱ截短基因、原核表达、生物学活性

所属期刊栏目：38

分类号：S852.4(动物医学（兽医学）)

资助基金：国家自然科学基金;江苏省农业科技自主创新项目

在线出版日期：2022-11-14（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：1272-1277