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10.3969/j.issn.1000-4440.2017.02.009

梨炭疽病菌原生质体遗传转化体系的建立及GFP标记菌株的获得

引用
为建立梨炭疽病菌的原生质体遗传转化体系,以梨炭疽病菌菌株II-17为供试菌株,研究了菌龄、酶解液组合及酶解时间等对梨炭疽病菌原生质体制备的影响.结果表明,制备梨炭疽病菌原生质体的适宜条件为:CM液体培养基培养分生孢子24 h后,再转接到新的CM液体培养基中培养24 h,获得新鲜的菌丝;最适酶解液组合为9.0 mg/ml裂解酶+1.0 mg/ml崩溃酶+1.0 mg/ml蜗牛酶;酶解时间为2.5~3.0 h时酶解效率最高.对获得的转化子进行PCR鉴定和荧光观察,结果表明,GFP标记基因已成功整合到梨炭疽病菌的基因组中,转化子发出强烈的绿色荧光且遗传性稳定.致病性测定结果表明,转化子致病性与野生型菌株无明显差别,成功获得了梨炭疽病菌的GFP标记菌株.

梨炭疽病菌、遗传转化、原生质体、GFP标记菌株

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S661.2(果树园艺)

江苏省农业科技自主创新基金项目CX151023

2017-06-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)

共6页

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江苏农业学报

1000-4440

32-1213/S

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2017,33(2)

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