核转运蛋白α2基因沉默对黑色素瘤细胞增殖和侵袭能力的影响

摘要：

目的 基于肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库探讨核转运蛋白α2(KPNA2)在黑色素瘤中的表达及KPNA2基因沉默后对黑色素瘤细胞增殖、侵袭的影响.方法 通过TCGA数据库检索黑色素瘤组织中KPNA2 mRNA表达水平及其与患者预后的关系,分析黑色素瘤中KPNA2的共表达基因并对基因进行基因本体论(GO)、京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析.检测黑色素瘤细胞系中KPNA2表达水平,选择KPNA2高表达细胞系A375,瞬时转染小干扰RNA敲低KPNA2的表达.采用CCK-8法、Transwell实验和蛋白印迹法(Western blot)分析KPNA2基因沉默对黑色素瘤细胞系A375增殖、侵袭能力和磷酸化P53(p-P53)蛋白表达水平的影响.结果 黑色素瘤组织中 KPNA2 mRNA相对表达水平为6.439(5.800,6.958),高于正常组织的4.035(1.726,3.538),差异有统计学意义(P＜0.001).KPNA2高表达患者中位生存时间为63.9个月,短于KPNA2低表达患者的104.6个月,差异有统计学意义(P=0.011).GO、KEGG富集分析显示,黑色素瘤中KPNA2共表达基因涉及的信号通路主要包括P53信号通路、细胞循环等,涉及的细胞组分包括细胞间桥等,生物学过程包括细胞循环周期等,分子功能包括DNA复制起点结合等.KPNA2在黑色素瘤细胞系A375、A875和SK-MEL-28中均有表达,且在A375细胞系中表达量更高,故选用A375细胞进行后续研究.CCK-8法检测结果显示,培养72、96 h后,KPNA2基因沉默后的A375细胞增殖能力低于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P＜0.05);Transwell实验结果显示,KPNA2基因沉默后的A375细胞侵袭能力低于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).Western bolt结果显示,KPNA2基因沉默后的A375细胞中p-P53蛋白表达水平高于空白对照细胞和空载细胞,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 KPNA2 mRNA在黑色素瘤中显著高表达,且与患者的不良预后有关.KPNA2基因沉默可促进抑癌基因P53的磷酸化,从而调控P53信号通路参与黑色素瘤细胞的增殖和侵袭.

关键词：黑色素瘤、核转运蛋白α2、增殖、侵袭、P53信号通路

所属期刊栏目：27

分类号：R739.5;R73-3(肿瘤学)

资助基金：皖南医学院博士研究启动基金;皖南医学院校中青年科研项目

在线出版日期：2023-04-18（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共7页

页码：97-103