微小RNA-491在宫颈癌细胞的增殖、侵袭及迁移中的作用及分子机制
目的 探讨微小RNA-491(miR-491)在宫颈癌(CC)细胞增殖、侵袭及迁移中的作用及分子机制.方法 收集CC患者的58对癌组织及癌旁组织标本;采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测CC组织和癌旁组织(对照组)中miR-491和爪蟾驱动蛋白样蛋白2的靶向蛋白(TPX2)的表达水平.将CC细胞系中的Hela和HT-3细胞随机分为NC组[磷酸盐缓冲液(PBS)处理]、miR-491组(过表达miR-491处理)、si-TPX2组(抑制TPX2)、TPX2组(过表达TPX2)及miR-491+TPX2组(同时过表达miR-491和TPX2).采用细胞活力和克隆形成实验测定miR-491对CC细胞增殖能力的影响;采用双荧光素酶报告实验验证miR-491和TPX2的靶向关系;采用划痕和侵袭实验检测miR-491对CC细胞侵袭和迁移能力的影响;构建裸鼠成瘤模型验证miR-491和TPX2对肿瘤生长的影响.结果 miR-491在CC组织和细胞中的表达降低,而TPX2的表达升高,差异有统计学意义(P<0.05).过表达miR-491能够抑制CC细胞的细胞增殖.双荧光素酶报告结果表明,与NC组比较,miR-491模拟物可以降低PmirGLO-TPX2-3'UTR WT的荧光素酶活性,差异有统计学意义(P<0.05).细胞活力和凋亡检测结果发现,miR-491能够通过调控TPX2抑制细胞增殖来增高细胞凋亡率.进一步的划痕和transwell检测结果发现,miR-491过表达能够抑制细胞的迁移和侵袭,而TPX2过表达能够促进细胞迁移和侵袭.肿瘤体积和质量检测结果发现,miR-491能够抑制肿瘤生长,而TPX2过表达能够促进肿瘤生长且这种促进作用能够被miR-491逆转.苏木精-伊红染色(HE)检测发现,miR-491组的肿瘤组织出现部分坏死,而TPX2组肿瘤细胞增殖明显.结论 miR-491能够通过调控TPX2的表达影响CC进程,为未来CC生物标志物的选择及治疗靶点提供理论依据.
宫颈癌、微小RNA-491、细胞增殖、细胞迁移、组织坏死、细胞活力
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R737.3;R394.3(肿瘤学)
2022-06-10(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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