10.3969/j.issn.1672-2353.2006.05.006
SARS病毒S蛋白编码基因表达载体的构建及在Vero细胞中的表达
目的构建含SARS病毒S蛋白编码基因片段的表达载体,并将其置于Vero细胞中表达.方法设计1对PCR引物,在其下游引入Flag序列,通过PCR方法从质粒pGEX-6P-1-SARS-S中扩增出S蛋白编码基因, PCR产物经酶切后,插入表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-SARS-S.重组质粒经酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析后转染Vero细胞,用抗Flag单克隆抗体通过Western blot检测S蛋白片段在Vero细胞中的表达.结果酶切鉴定及核苷酸序列测定和分析示重组质粒构建完全正确;Western blot证实重组S蛋白片段能够在Vero细胞表达.结论融合Flag序列的SARS病毒S蛋白片段在Vero细胞中获得了正确表达.
传染性非典型肺炎、冠状病毒、S蛋白、表达
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R3(基础医学)
2006-07-07(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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