10.3969/j.issn.1005-0507.2012.03.004
家蝇源抗K562活性物质的分离与纯化
为从家蝇Ⅲ龄幼虫体内提取具有抗K562细胞活性的物质,并对其组分化学性质及对人正常细胞的作用进行分析.本文用大肠杆菌诱导家蝇Ⅲ龄幼虫大量表达活性物质,然后通过研磨、离心、固相萃取法(SPE)初步分离活性物质,通过反相高效液相色谱(RP-HPLC)进一步纯化提取活性组分,通过四甲基偶氮噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色法和光镜观察法相结合,筛选出对K562有抑制作用的活性组分,并鉴定其对人正常细胞293T的作用.结果显示,从家蝇Ⅲ龄幼虫体内分离出4个具有抑制K562细胞活性的多肽组分(峰5~8),具有分离度高、纯度高等特点.当质量浓度为100 μg/mL和作用时间为24 h时,4个多肽组分均具有抗K562细胞的活性,其中峰5多肽组分和峰8多肽组分活性较强,对K562细胞的相对抑制率分别为48.52%和65.80%.结果表明,家蝇Ⅲ龄幼虫体内存在一些具有抗K562细胞活性的多肽,而且对人正常细胞几乎无杀伤作用.但是,这些多肽是否属于抗肿瘤肽还有待被证实.
反相高效液相色谱、家蝇Ⅲ龄幼虫、多肽、K562、293T
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R73;X50
山西省高校科技研究开发项目200613011;山西省科技攻关项目2006031087-04;太原市科学技术发展计划项目081049
2012-11-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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