10.3969/j.issn.1005-0507.2012.03.003
中华按蚊前酚氧化酶基因部分序列的基因结构和功能预测
前酚氧化酶是一种黑色素合成酶,是节肢动物体内的一种重要免疫蛋白.为了克隆中华按蚊Anopheles sinensis前酚氧化酶(Prophenoloxidase,PPO) 基因部分序列,根据已报道的多种昆虫 PPO 氨基酸的保守序列设计简并引物,以中华按蚊总 RNA 为模板进行RT-PCR 扩增,目的片段经 TA 克隆后测序.所得中华按蚊 PPO 基因(ASPPO) 部分序列长597 bp,编码 199 个氨基酸;与几种近缘蚊种的PPO基因序列同源性分别达57%~100%不等.经在线比对,该序列在基因组中分属两个外显子区域,中间含有一个内含子.推导的氨基酸序列含有两个铜离子结合位点,与目标序列相符,表明成功克隆出ASPPO部分序列.所得序列登录GenBank,登录号:JX295575,JX295576.推导的氨基酸序列提交瑞士蛋白质空间构象模拟平台Swiss-model,以冈比亚按蚊免疫相关前酚氧化酶为模板进行空间3D构象模拟,SPDview软件分析拉氏构象图.结果显示拉氏构象得分较高而QMEAN得分较低,近似跨膜蛋白值,提示该该蛋白是否为中华按蚊中肠和血淋巴疟原虫免疫蛋白尚不确定,需进一步研究.
中华按蚊、前酚氧化酶原、基因克隆
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S8 ;R1
the grants from the Infectous Diseases Prevention and Gure Project of China2012ZX100084-004-017,2013ZX10004218-008;the special projectAWS11C001,AWS11L009,09MA1111
2012-11-21(万方平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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