五种破壁方法提取贵阳腐霉Pythium guiyangense总RNA效果的比较

摘要：

为了探索提取贵阳腐霉Pythium guiyangense菌株总RNA简便而有效的方法,我们分别采用石英沙研磨、超声波破碎、液氮研磨、液氮加石英沙研磨和溶菌酶消化5种方法破碎真菌细胞壁,再用市售RNAsimple total RNA kit试剂盒提取总RNA,最后通过对提取物进行琼脂糖凝胶电泳定性、紫外比色定量及PCR检测来评价各种破壁方法的优弊.结果显示液氮加石英沙研磨破壁法提取的真菌总RNA在5种方法中效率最高,OD260/OD280=2.093±0.264,RNA浓度为(0.134±0.021)μg/μL,RNA制备效率为(26.76±4.10) μg/g菌丝体,并且该方法操作简便,重复性最好,是制备P.guiyangense菌株总RNA的首选破壁方法.

关键词：贵阳腐霉Pythium guiyangense、破壁、总RNA

所属期刊栏目：18

分类号：S89;S85

资助基金：四川省教育厅青年基金项目10ZB095;成都医学院综合性、设计性实验项目ZH2010003

在线出版日期：2012-06-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：242-246