SiRNA沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞对人异体T淋巴细胞分泌功能及其诱导成骨能力的影响

摘要：

目的:探讨应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的人骨髓间充质干细胞(hBMSCs)对人异体T淋巴细胞分泌功能的调节作用及诱导成骨能力的影响.方法:用siRNA转染至第3代hBMSCs将转染前、后各组的hBMSCs与PHA刺激的人异体T淋巴细胞共同培养,用ELISA检测各培养组上清液γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素2(IL-2)的水平；对2组细胞进行成骨诱导分化培养,观察细胞形态变化；碱性磷酸酶染色、计数和Vor- Kossa染色、计数检测成骨能力.结果:hBMSCs表面抗原CD44、CD166阳性.转染前hBMSCs的HLA-A2表达为阳性,转染后hBMSCs的HLA-A2表达为弱阳性；转染前hBMSCs的HLA-A2蛋白表达量高于转染后的HLA-A2蛋白表达量.转染前、后的hBMBCs均能抑制人T淋巴细胞分泌IFN-γ、IL-2,转染前、后比较有差异.ALP染色显示转染前、后的hBMSCs均出现胞质呈棕黑色的阳性反应,ALP活性检测结果显示2组之间无差异.Vor-Kossa染色显示转染前、后的hBMSCs均有钙结节形成,统计2组之间无差异.结论:应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs可以抑制PHA刺激人T淋巴细胞分泌因子IFN-γ、IL-2的水平,转染后的hBMSCs比未转染的hBMSCs抑制作用更强.应用RNAi技术沉默HLA-A2表达的hBMSCs,不影响其成骨能力.

关键词：骨髓间充质干细胞、RNAi技术、T淋巴细胞、分泌功能、成骨能力

所属期刊栏目：35

分类号：R71;R33

资助基金：辽宁省教育厅基金LT2010061;辽宁省自然科学基金20102138;辽宁医学院青年科技启动基金Y2010Z004

在线出版日期：2012-10-25（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共5页

页码：145-148,封2