T10对深低温保存动物模型坐骨神经生物活性及移植后神经再生和功能恢复的影响

摘要：

目的 探究雷公藤甲素(Triptolide,T10)对深低温保存动物模型神经活性和功能的影响.方法 收集30只SD大鼠双侧15mm长的坐骨神经组织,随机分为3组:冻存组、低浓度T10组(L-T10)和高浓度T10(H-T10)组,分别在含有0、1×10-9、1×10-8mol/L的T10的冻存液中、在-4℃的条件下低温保存4周.另取10条新鲜的长度为15 mm坐骨神经组织作为对照组.30只Wistar大鼠随机分为3组:冻存组、L-T10组和H-T10组,均构建坐骨神经10 mm损伤模型,将低温保存的坐骨神经修剪成10 mm进行异体移植.另取10只Wistar大鼠做坐骨神经自体移植模型.用TEM观察坐骨神经结构;利用Calcein-AM/DAPI荧光染色检测坐骨神经活性;神经电生理检测肌肉复合动作电位(CMAP)和运动神经传导速度(MNCV);Westernblot检测NGF和GDNF蛋白.结果 在冻存4周后,各组均出现不同程度的脱髓鞘样改变,并且出现空泡和轴浆萎缩,其中冻存组坐骨神经损伤最严重,H-T10组损伤情况较冻存组和L-T10组轻.对照组的细线坐骨神经组织中活细胞最多.冻存组活细胞减少.L-T10组和H-T10组的存活细胞较冻存组多,并且H-T10组的存活细胞多于L-T10组.冻存组的NGF和GDNF水平显著低于对照组(P＜0.05),L-T10组和H-T10组的NGF和GDNF显著高于冻存组(P＜0.05),并且H-T10组的NGF和GDNF水平高于L-T10组(P＜0.05).在移植20周后,冻存组的CMAP和MNCV显著低于对照组(P＜0.05),L-T10组和H-T10组的CMAP和MNCV显著高于冻存组(P＜0.05),并且H-T10组的CMAP和MNCV水平高于L-T10组(P＜0.05);冻存组的神经再生的情况显著低于对照组(P＜0.05),L-T10组和H-T10组的有髓神经纤维数目和髓鞘厚度/纤维直径显著高于冻存组(P＜0.05),并且H-T10组的有髓神经纤维数目和髓鞘厚度/纤维直径水平高于L-T10组(P＜0.05).结论 T10可提高深低温保存坐骨神经的活性,并且促进异体移植后坐骨神经的神经再生和功能恢复.

关键词：雷公藤甲素、低温保存、坐骨神经、神经再生

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在线出版日期：2022-04-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

页数：共6页

页码：33-38